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Un exemple concret
Pour ensemencer une boîte de Petri, le manipulateur travaille dans la zone protégée par la flamme du bec Bunsen. Il flambe l'anse métallique jusqu'au rouge, la laisse refroidir, prélève la colonie, puis entrouvre la boîte le moins longtemps possible avant de la refermer.
Le piège à éviter
Confondre asepsie et antisepsie. L'asepsie prévient l'apport de germes ; l'antisepsie élimine les germes déjà présents sur un tissu vivant, comme la peau, à l'aide d'un antiseptique.
Pour aller plus loin
Les règles d'asepsie commencent par la préparation du poste : paillasse nettoyée et désinfectée, mains lavées, cheveux attachés, blouse fermée. Le matériel utilisé est stérile, c'est-à-dire exempt de tout micro-organisme vivant, ou stérilisé juste avant l'emploi. Les gestes sont réalisés dans la zone protégée par la flamme, ou sous un poste de sécurité microbiologique (PSM), une enceinte ventilée qui filtre l'air.
Plusieurs procédés produisent du matériel stérile. La stérilisation par la chaleur humide se fait à l'autoclave, sous pression, à une température supérieure à 100 °C. Le flambage stérilise les anses et les cols de tubes. La filtration sur membrane stérilise les liquides qui ne supportent pas la chaleur. La désinfection, elle, réduit le nombre de micro-organismes sur des surfaces inertes sans garantir leur élimination totale. Chaque procédé est choisi selon la nature du matériel ou du liquide à traiter, et selon sa résistance à la chaleur.
L'asepsie conditionne la validité des résultats : une contamination fausse un dénombrement, une identification ou un antibiogramme. Elle a aussi un enjeu de sécurité, car certains micro-organismes sont pathogènes. Les micro-organismes sont classés en groupes de risque, et le niveau de confinement du laboratoire est adapté au groupe manipulé. Après la manipulation, les déchets contaminés sont décontaminés, par exemple à l'autoclave, avant élimination. Ces compétences sont évaluées lors des épreuves pratiques de biotechnologies en STL.
Ne pas confondre
- Antisepsie : L'antisepsie élimine ou inactive les micro-organismes présents sur un tissu vivant ; l'asepsie empêche que des micro-organismes soient apportés.
- Stérilisation : La stérilisation est un procédé qui détruit tous les micro-organismes d'un matériel ; l'asepsie est l'ensemble des pratiques qui maintiennent cet état stérile.
- Désinfection : La désinfection réduit le nombre de micro-organismes sur une surface inerte, sans garantir la stérilité.
Dans ta copie
Avant de réaliser l'isolement, je prépare mon poste de travail : la paillasse est désinfectée, le bec Bunsen allumé et le matériel nécessaire disposé à portée de main. Je travaille dans la zone de protection de la flamme. Je stérilise l'anse par flambage jusqu'au rouge, je la laisse refroidir, puis je prélève une colonie. J'ouvre la boîte de Petri en soulevant légèrement le couvercle, je réalise mes stries et je la referme aussitôt. Ces gestes d'asepsie évitent que des germes extérieurs ne contaminent la culture et faussent mon résultat.
À retenir
- L'asepsie empêche l'apport de micro-organismes dans une culture ou un milieu.
- Elle protège à la fois la manipulation et le manipulateur.
- Le travail se fait près de la flamme ou sous un poste de sécurité microbiologique.
- Le matériel stérile est obtenu par autoclave, flambage ou filtration.
Teste-toi
STL · question corrigée
Pourquoi travaille-t-on près de la flamme d'un bec Bunsen en microbiologie ?
Voir la réponse
Réponse D. La flamme crée autour d'elle une zone où l'air chaud ascendant limite le dépôt des micro-organismes en suspension.
STL · question corrigée
Quelle méthode convient pour stériliser une solution qui ne supporte pas la chaleur ?
Voir la réponse
Réponse C. La filtration sur une membrane aux pores très fins retient les micro-organismes sans chauffer la solution.
Questions fréquentes
Faut-il laisser refroidir l'anse après l'avoir flambée ?
Oui. Une anse brûlante tuerait les bactéries prélevées ou ferait éclater la gélose. On attend quelques secondes en la gardant dans la zone protégée.
Les gants suffisent-ils à garantir l'asepsie ?
Non. Ils protègent le manipulateur, mais ils peuvent eux-mêmes transporter des germes. Ce sont surtout les gestes et le matériel stérile qui assurent l'asepsie.
Notions liées
Pour réviser tout le chapitre, va sur la page STL, ou retrouve toutes les définitions dans le lexique du bac. Dans l'application, les quiz reprennent ces notions sur le programme de ta série.